谷氨酸含量檢測試劑盒
規格:微量法 96樣
檢測原理:INT法
編號:GLU.I-W96-N(1720)
檢測波長:490nm
線性范圍:5-60 mg/L (以待測液濃度)
檢出限:2 mg/L (以待測液濃度)
注 意:
1、正式測定前務必取 3 - 5 個預期差異較大的樣本做預測定;
2、為了您的安全和健康,請佩戴好防護用具;
測定意義:
谷氨酸(Glu)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,不僅是組成蛋白質的20種氨基酸之一,而且通過轉氨基作用參與多種氨基酸合成,是生物體內主要氨基來源之一。此外,Glu還是味精的主要有效成分,常用做食品添加劑以及香料生產。
測定原理:
用高氯酸溶液提取測試樣品中的游離L-(+)-谷氨酸(C5H9NO4)。NAD在谷氨酸脫氫酶的存在下被L-(+)-谷氨酸還原。所得到的NADH在心肌黃酶的存在下與INT反應。在490nm波長下測量所得甲瓚的含量,并計算測試樣品的游離L-(+)-谷氨酸含量。
自備儀器和用品:
酶標儀、96孔板、可調式移液器、低溫離心機、震蕩儀、pH試紙、冰、蒸餾水
試劑清單:
試劑名稱 | 規格 | 數目 | 貯藏 | |
提取液 | 液體 110mL | x1 | 4°C | |
試劑一 | 液體 80mL | x1 | 4°C | |
試劑二:A液 | 液體 20mL | x1 | 4°C | |
試劑二:B液 | 液體 5mL | x1 | 4°C | |
試劑三 | 粉劑 | x1 | -20°C,避光 | |
試劑四 | 粉劑 | x1 | -20°C,避光 | |
試劑五 | 粉劑 | x1 | -20°C,避光 | |
試劑六 | 粉劑 | x1 | -20°C,避光 | |
標準品母液 | 液體 2mL | x1 | 4°C,避光 | 1g/L L-谷氨酸 標準溶液 |
結果計算:
以標準品濃度(mg/L)為橫坐標(x),以其對應的 標準管△A(△A =A2- A1)為縱坐標(y),繪制擬合曲線,即可得到線性方程y=kx+b
1、計算樣本待測液中谷氨酸濃度
C1 = (△A-b)÷k
C1:樣本待測液中谷氨酸濃度,mg/L;
△A:樣本測定管△A(△A =A2- A1);
b:標準曲線方程系數;
k:標準曲線方程系數;
2、計算樣本中谷氨酸含量
(1)按照樣本質量計算
谷氨酸含量(g/100g)= C1÷(W×10 000)×(V2÷V1)×[V提+(Wm×W)]×D
V提:樣本處理時提取液用量,1mL;
V1:樣本處理步驟3上清液取樣量,0.3mL;
V2:樣本處理步驟3終體積,1mL;
W:樣本取樣質量,g;
Wm:樣本水分含量(百分比),%;
10 000:單位換算系數;
D:額外稀釋倍數,未稀釋即為1;
對于測定含水量較高的肉類樣本,可代入樣本水分含量以提高計算精確度,水分測定方法可參考《ISO 1442 肉與肉制品 水分含量測定》、《GB 5009.3-2016 食品中水分的測定》;
(2)按照液體體積計算
谷氨酸含量(g/L)= C1÷1000×((V提+V)÷V)×(V2÷V1)×D
V提:樣本處理時提取液用量,0.2mL;
V1:樣本處理步驟3上清液取樣量,0.1mL;
V2:樣本處理步驟3終體積,0.3mL;
V:樣本取樣量,0.1mL;
1000:mg到g的換算系數;
D:額外稀釋倍數,未稀釋即為1;
備注:僅供科研實驗使用!
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